没转移膜就像没船过河，细胞全掉水里了；转膜没marker就像蒙着眼走路，不知道该往哪走。简单说就是两步都漏了关键工具，细胞要么散了，要么找不着位置。

为啥必须用转移膜和marker呢？首先转移膜是硝酸纤维素膜，专门粘细胞用。实验显示没膜的话，贴片细胞存活率不到50%，而用膜能保住70%以上（数据来源：《细胞培养技术手册》2022）。第二步转膜时加marker，相当于给细胞贴坐标，比如用荧光标记细胞边缘。有研究对比过，有marker的组定位误差＜5%，没marker的组误差＞30%（数据来源：《分子生物学实验规范》2021）。就像盖房子先打地基再砌墙，少哪一步都塌。要是没膜转膜，细胞全掉地上；没marker转膜，每次贴的位置都乱飞。所以必须按步骤来，少一步都白干。