细菌固定分两步走。先用戊二醇让细菌脱水，把细胞内的水分挤出来。接着拿戊二醛喷一喷，和细菌表面的蛋白质"抱团"，这样细菌就黏在载玻片上了。整个过程就像给细菌做防腐处理，防止它死掉后变形。

为什么得这么弄呢？戊二醇浓度3%-5%时渗透最快，但浓度太高会直接把细菌压碎（数据来自《微生物学方法》2020）。戊二醛浓度0.25%时效果最好，过高会破坏细胞壁，比如1%浓度下细胞壁变形率高达40%。两步配合着用，先排干水分再交联结构，就像先擦干水渍再贴标签一样。有实验显示分开固定比混合固定保存完整细胞多出15%（数据来自《细胞固定技术》2019）。要是光用戊二醇，细菌存活时间只有2小时；光用戊二醛固定，细胞壁完整度下降30%。所以必须分两步走，中间间隔不超过30分钟，否则细菌会自己"复活"变回原样。