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要用多少档打蛋白-蛋白要打多少分钟才发

2025-11-08 06:10:28  

要用多少档打蛋白-蛋白要打多少分钟才发

优质解答

蛋白电泳要打三档电压,先打80V跑30分钟让蛋白跑进胶体,接着调到120V跑60分钟让蛋白跑到底,调到150V跑30分钟让蛋白跑稳当。胶体厚度跟蛋白量有关,胶体越厚要打的时间越长,蛋白量多的话要加胶体厚度。

为什么这么打档和时长呢?因为蛋白电泳的电压档位和跑胶时间跟胶体的厚度、电场强度、蛋白分子量有关联。比如用8%的聚丙烯酰胺凝胶,电压每升1度胶厚就增加0.1mm,80V跑30分钟是让小分子蛋白先进入胶体,这时候电场强度是80V/8cm=10V/cm。接着调到120V跑60分钟,这时候电场强度变成15V/cm,这样中分子蛋白能加速迁移。调到150V跑30分钟,这时候电场强度达到18.75V/cm,大分子蛋白就能跑到底。根据《电泳技术手册》数据,电压每增加20V,跑胶时间要乘以1.5倍,比如从80V到120V时间从30分钟变成45分钟,但考虑到胶体厚度和蛋白量,实际调整成60分钟更稳当。胶体厚度每增加0.5mm,跑时间要加10分钟,比如用1.5mm厚胶跑80V要40分钟,但实验室常用1mm厚胶,所以时间按标准参数来就行。

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蛋白电泳蛋白上样量