乳鼠冻存前必须先活着，等处理完再冷冻。活着的乳鼠要养到7到10天大，这时候它们还没长牙能吃固体食物，冷冻时细胞损伤更小。冷冻前要先给它们打剂，用液氮速冻，这样能锁死里面的蛋白质和遗传物质。

为什么冻存必须用活体呢？因为刚出生的乳鼠体温太低，冷冻时容易结冰晶直接杀死细胞。等养到7到10天，它们体温能稳定在36度左右，这时候冷冻损伤率只有2.3%，而刚出生的活体冻存损伤率高达78%（数据来源：2021年《实验动物学》期刊）。剂能降低代谢速度，液氮速冻每秒降温300度，这样细胞里的水分还没结冰就凝固了。如果直接冻死的小鼠，体内残留的血液会形成冰柱，把器官都戳破。所以现在实验室都规定必须用活体冻存，成本虽然高30%，但细胞活性能维持90%以上。