提拉米苏的酸味主要来自咖啡酒和柠檬汁的添加，还有奶酪本身的酸度。咖啡酒里含有少量有机酸，而柠檬汁的pH值在5.5左右，直接提味。有些配方还会用酸奶油，搅拌时空气进入会让味道更柔和。

咖啡酒中的酒精度越高酸味越明显，比如40%酒精度含0.5%有机酸，这比纯水多出十倍酸度。柠檬汁每公斤含0.6%柠檬酸，相当于每杯提拉米苏多加3克酸。意式配方用马斯卡彭奶酪，其乳酸含量比普通奶酪低20%，所以酸味更温和。数据显示，加入咖啡酒后成品酸度从0.3%上升到0.8%，柠檬汁则让酸度再涨0.5%。但要注意，如果咖啡酒放太久，酒精挥发会让酸味变苦，这和保存时间有关。比如放三天后酸度会从0.8%降到0.6%，同时苦味增加0.2%。