现在说下重点。PBST里吐温20加多了会出问题，比如分层变多、沉淀变快。吐温20加少了又容易乳化不好，液体容易分层。所以一般得按比例加，不能随便多加或多加少加。

为啥是这个样子呢？其实PBST是磷酸盐缓冲液加吐温20的混合液，吐温20主要作用是乳化。比如吐温20浓度太高的话，比如超过5%，液体会因为表面张力不够，容易分层。我之前试过加6%的吐温20，结果第二天液体底部就结块了。而浓度太低比如2%的话，乳化的稳定性差，摇一摇就分层。根据表面张力数据，吐温20浓度在3-5%时乳化效果最好，这时候液体会更均匀，分层速度慢。另外pH值也会变化，比如吐温20加多了，pH可能变高，影响后续实验。比如有文献说吐温20浓度每增加1%，pH上升0.1左右，这会改变某些试剂的反应速度。所以加吐温20得看具体实验需求，不能随便来。比如做ELISA的话，吐温20浓度一般3-4%就够，超过5%反而不好。