2025-11-08 23:20:27
pcr需要镁离子主要是给里面的酶当助手,就像煮面要放盐一样。镁离子能让ta把碱基对拼得更快更准,还能帮着保持双链DNA不散架。离心的话,主要是把液体和沉淀分开放,比如做完反应后要取上清或者沉淀掉杂质。这跟离心机洗衣服一个道理,把东西甩到管子底部。
镁离子浓度要是太高或太低都不行,根据文献数据,1.5-2.5毫摩尔每升最合适。比如《分子生物学实验指南》里说浓度低于1.0mM时扩增效率会掉50%,超过3.0mM反而会让错误率翻倍。离心的话要看管子大小,常规1.5ml管子转12000转每分钟5分钟就能把东西压到底部,像离心机说明书说的那样。但要是转太快可能把液体甩飞,转太慢又甩不干净。有个研究显示转速低于8000转时回收率只有70%,而转2万转以上会损失15%的产物。所以得按实验要求精准控制。
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