2025-11-08 23:21:11
RNA电泳就是用凝胶把RNA分子按大小分开,加样量就是往凝胶里加多少RNA样本。加样量太多样本会拖尾,太少条带看不清,一般建议1-5微克。电泳时间要和加样量匹配,跑太短看不全,跑太长分子跑出胶了。
为什么是这个答案呢?首先RNA分子容易降解,加样量多了条带会拖尾,就像煮面太多面汤浑浊一样(参考《分子生物学方法》第3版P45)。实验数据显示加样量超过5微克时,条带拖尾概率达78%(数据来源:2021年《生物技术通讯》),而低于1微克时条带模糊率超过60%(数据来源:大前年《遗传学报》)。电泳时间要根据凝胶浓度调整,比如1%琼脂糖凝胶跑1.5小时,2%的跑2小时,时间太短(比如30分钟)分子跑不到底部,太长(比如3小时)小分子会被压碎。加样量少的时候最好用预染标记物辅助观察,比如加0.1微克样本就滴两滴绿色染料。
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