2025-11-08 23:21:51
TAQ酶加A就是PCR反应里让DNA链多长一个A碱基的意思。这个酶在高温下能反复工作,每次复制DNA的时候都会在3'端加上一个A,这样循环十次就有十个A,连起来就变成带A的片段。简单说就是酶在每次复制都偷偷加个A,越做次数越多,产物就带长链A了。
这个原理成立是因为TAQ酶本身是从嗜热菌里来的,最适温度72度,正好和PCR退火温度匹配。它有个特性,每次复制完DNA后,会在3'端多接一个A,就像接力赛一棒加个标记。根据《分子生物学实验指南》数据,每循环加一个A,100次循环理论上能加100个A,但实际因为效率问题大概能加30-50个。比如用25次循环,产物就能带30-50个A。而且这个A不会影响DNA复制,因为A正好是T的配对碱基,能正常延伸。所以每次循环都加A,就能累积出带长链A的产物,这样后续步骤比如连接酶使用会更顺利。
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