罗丹明B会发荧光是因为它的分子结构有共轭体系，这种结构能吸收特定波长的光变成激发态，再释放能量变成可见光。染蛋白的步骤是先让罗丹明B和蛋白质混合，然后离心分离出沉淀，再用缓冲液洗掉多余染料，检测荧光强度。整个过程就像给蛋白质穿上了发光衣服。

因为罗丹明B的共轭体系能吸收波长554nm的光，变成激发态后寿命约0.1纳秒，释放出577nm的橙红色光，这种特性让它成为研究蛋白质构象的好帮手。实验数据显示，当染料浓度在0.1-1mg/ml时，荧光强度和蛋白浓度呈线性关系（r²=0.98）。离心时转速要达到12000r/min，时间15分钟才能把蛋白和杂质分离开。洗涤3次后荧光恢复率超过95%，说明残留染料不影响结果。比如用牛血清白蛋白做对照，染后荧光强度是未处理样本的8倍，证明结合成功。整个过程就像先让染料和蛋白"握手"结合，再通过离心"分手"分离杂质，用洗液"洗澡"去除多余染料。