蛋白印迹就像给蛋白质做身份证照。先把细胞捣碎，把需要的蛋白质摊在凝胶上，凝胶能按分子大小排队。排好队后，用转膜机把蛋白质转到膜上，就像把照片印到纸上。接着用抗体当探测器，一抗和二抗排队找目标蛋白，用化学方法显影看条带。条带越明显说明蛋白越多，条带位置对应该蛋白的分子量。

为什么这样操作呢？因为抗体和蛋白结合有特异性，比如文献说抗体的特异性结合率超过90%。跑胶转膜后抗体一抗孵育两小时，二抗孵育一小时，这样能确保目标蛋白被精准识别。凝胶上的蛋白质按分子量分开，比如30kD的蛋白在跑胶后会在特定位置，转膜后膜上的蛋白分布和凝胶一致。显影时用ECL化学发光，比普通显影更灵敏，能检测到0.1μg的蛋白。实验重复三次，条带出现三次才确认有效。对比阴性对照，排除非特异性结合干扰。