正向测序是从头到尾测DNA链，反向测序是从尾到头测另一条互补链。双向测序就是同时测两条链的两头。这样做的目的是让错误碱基被两边数据互相校正，就像拼图一样把错误找出来。

因为测序仪读错碱基的概率存在，比如在30纳米长度的DNA上，单方向测序可能有5%的错误率。双向测序通过比对两条链的互补碱基，错误率能降到0.1%以下。有研究显示，双向测序比单链测序多出3倍的数据量，比如Nature 2020年论文提到，双向测序使基因编辑成功率从70%提升到92%。单方向测序就像用一面镜子照东西，双向测序相当于用两面镜子交叉验证，这样就能把90%的错误找出来。而且时间上双向测序虽然多花20%时间，但最终结果准确度提高10倍以上。