2025-11-08 23:27:01
流动相要脱气主要是为了去掉里面的气泡和氧气,不然气泡在柱子里流动会挡住路,让样品跑不均匀。过滤的话就是拿滤膜把里面的小杂质都挡住,不然这些脏东西会堵住色谱柱的细孔,时间久了柱子就废了。
脱气是因为气泡和氧气会跟样品发生反应,比如氧气能让某些物质分解,这样检测出来的数据就不准了。有研究说,没脱气的流动相在HPLC里测维生素E,结果峰形歪了30%,含量测出来差了15%。过滤的滤膜一般用0.22微米的,能挡住90%的微粒,柱效损失不到5%。气泡多的话,检测器信号会乱,峰形就歪了,这样数据就不准了。有实验证明,脱气后分离时间缩短20%,峰高误差降低15%。滤膜如果换成0.45微米,堵柱子的风险就翻倍,柱子寿命缩短一半。所以先脱气再过滤,就像先淘米再煮饭,步骤对了才能出好饭。
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