冷冻保存就是给细菌做“冬眠”处理，温度要够低才能让细菌暂停活动。通常用-80℃的冰箱或者液氮罐冻，保存时间别太长，1到3个月最好，超过半年细菌就活不好了，得重新培养。冷冻前要加保护液，比如甘油，这样细菌冻醒后还能用。

冷冻保存要怎么操作呢，冷冻温度必须够低，一般要-80℃或者液氮，保存时间别太长，1到3个月最好，超过半年细菌就活不好了，得重新培养。因为不同细菌耐寒能力不一样，比如大肠杆菌在-80℃冻6个月还能活70%，但像枯草芽孢杆菌可能只能存3个月。保护液能防止冰晶伤到细菌细胞膜，数据说加了10%甘油的样本存活率比不加的高40%。反复冻融最伤人，冻一次复苏一次，细菌存活率每循环降5%，所以尽量冻一次用完。液氮冻12个月的数据显示，存活率还能保持90%，但复苏时要快速操作，别让细菌解冻了。