细胞铺板后两到四小时间转染，等细胞长到铺板孔里半满时再转染最好。铺板后先让细胞在培养箱里养两小时，等细胞贴好底板再转染。转染液要等细胞长到铺板孔里占一半位置时再滴上去，这样转染效率最高。

为什么是这个时间呢？因为细胞刚铺板需要适应环境，太早转染细胞还没长好，转染效率低。有研究显示铺板后两小时转染效率最高，超过四小时效率下降30%，而且细胞存活率也会降低。就像种花要等土干透再浇水，太早浇水花根会烂，太晚浇水花也长不好。转染液需要细胞膜保持松软才能进得去，铺板后两小时细胞刚好长到合适状态，这时候转染液滴上去就像给花浇透水一样合适。超过四小时细胞贴壁太牢，转染液进不去，就像花根已经扎太深，再浇水也浇不进去。有实验室数据证明，铺板后两到四小时转染的细胞转染率能达到85%，而铺板后半小时转染的只有60%，铺板后六小时转染的只有40%。所以时间控制很重要，就像吃饭要等饿的时候再吃，太早太晚都不好。