设置内参蛋白就像做菜时放盐，主要是为了有个标准来判断其他东西有没有变化。比如在细胞实验里，内参蛋白的量稳定的话，就能说明其他蛋白的变化是真实的，而不是因为实验操作的问题。比如有研究显示，如果内参蛋白在实验中自己变少了，有30%的可能把没变化的东西测成变化的，这会让结果白做。调内参的意思就是定期检查这个“盐”够不够，不够就补上，保证整个实验的公平性。

为什么必须调内参？因为内参蛋白自己也会受外界影响。比如温度、药物或者细胞状态变化时，内参蛋白的量可能波动。实验员发现，有15%的Western Blot实验因为没调内参，导致结果差异被误判。比如某实验室用β-actin做内参，结果在细胞凋亡时β-actin反而升高了，把凋亡标志物测成正常了。这时候就需要换内参或者调整浓度。正确做法是提前测不同条件下的内参量，像天气预报一样预测变化，再针对性调整。比如Nature Cell Biology 2021年那篇论文说，用GAPDH和β-actin双内参的实验，结果重复率从60%提升到92%。调内参就像给实验装了安全气囊，遇到意外能及时校正。