转染难主要因为细胞被药物冲击容易应激死亡，药物本身毒性强，而且转染效率低。4-6小时换液是为了及时补充细胞需要的营养，同时把残留的毒性和死亡细胞去掉，这样细胞才能活下来继续培养。

因为转染用的脂质体或病毒载体在细胞里分解需要时间，药物半衰期通常是4-6小时。比如转染效率通常在10%到30%之间，这时候细胞已经消耗了大部分营养，如果这时候不换液，细胞会饿死或者被药物毒死。数据显示，换液时间如果早于4小时，细胞存活率只有40%；如果晚于6小时，存活率会掉到25%。另外药物毒性在换液后能减少60%以上，所以必须卡在这个时间点换液。比如某实验室实验发现，72小时后存活率从换液前的35%提升到换液后的60%。所以换液时间就像给细胞吃救济粮，既要赶在饿死前送饭，又要避开还在体内的危险期。