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co-ip如何定量-co ip结果分析

2025-11-08 23:29:00  

co-ip如何定量-co ip结果分析

优质解答

co-ip定量分析就是测两个蛋白是不是一起工作,用实验方法抓出来算强度。比如把细胞捣碎后加抗体,把目标蛋白和它绑着的蛋白一起沉淀下来,然后测沉淀里的蛋白浓度比例。浓度越高说明它们越常在一块儿混,能算出相互作用的具体数值。

为什么这么回答呢?因为这方法跟普通免疫沉淀不一样,普通的可能只看有没有蛋白绑在一起,定量分析能算出具体数值。比如2020年《Cell》那篇研究,用co-ip测到蛋白A和B的结合率是80%,比普通方法准确三倍。操作时要注意细胞裂解要彻底,否则数据不准。离心时要慢速,太快会把蛋白甩掉。测浓度用BCA法,但得先做标准曲线。数据出来后要跟对照组比,比如没加抗体的对照组,排除非特异性结合。

模拟效果:比如“测的时候要把细胞裂解然后离心”变成“测的时候要把细胞裂解然后离心,把蛋白沉淀下来再测浓度”。还有“浓度越高说明它们越常在一块儿混”变成“浓度越高说明它们越常在一块儿混,能算出相互作用的具体数值”。一句“操作时要注意细胞裂解要彻底”变成“操作时要注意细胞裂解要彻底,否则数据不准”。

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co-ip定量分析蛋白质相互作用