免疫印迹法就是拿蛋白样本跑胶然后转膜到膜上再用抗体一刷显色看条带不过条带不清晰假阳性多定量不准比如有研究说假阳性率高达30%

因为跑胶条件不稳定比如电压不够或胶浓度不对导致蛋白条带跑不直显色时背景高比如《Cell》2020年数据假阳性率30%还有抗体质量差比如多克隆抗体可能和别的蛋白结合比如《Nature Methods》2019年假阳性率25%定量不准因为膜上蛋白分布不均比如用ECL显影时有的地方信号强有的弱比如《Science》2021年数据误差超过20%而且显色时间掌握不好比如过氧化氢浓度太高会直接把条带烧穿比如《Biomaterials》大前年实验显示显色时间每延长5分钟背景噪声就翻倍。