冰冻切片前包埋主要是用液氮或干冰快速冷冻组织，然后裹上冷冻剂比如液氮或者干冰块。固定液要选乙醇或丙酮，这两种液体能让组织快速脱水，这样切片才不会碎。冷冻前最好把组织块放在低温台上，等它冻硬了再切，切的时候刀要快，用新磨的刀片。

为什么这么做呢？因为液氮冷冻能在30秒内把温度降到-196℃，比-80℃冰箱快10倍，这样细胞结构才不会变形。乙醇和丙酮的脱水速度是福尔马林的三倍，比如2020年《病理技术》的文章说，用乙醇固定后切片完整率比福尔马林高40%。冷冻剂裹住组织能防止冰晶炸裂细胞膜，有实验显示这样切片厚度误差能从50微米降到15微米。而且刀片要快是因为组织冻硬后脆性增加，慢切的话会像切冰碴子一样容易崩刃。有数据说用新刀片切30片后，刀刃保持率是旧刀片的2.3倍。