冰冻切片免疫组化就是先冷冻组织，切成薄片，再用抗体检测蛋白质。冷冻是为了保持细胞结构不变形，切片要薄到0.5毫米左右，染色前得用酒精脱水，在显微镜下看抗体标记的位置。整个过程大概需要两三个小时，关键步骤是切片不能晒到太阳，否则蛋白会变模糊。

为什么这样做呢？因为冷冻能锁住细胞里的蛋白质，像给标本装了保鲜膜。研究显示正确操作可使检测率提高30%，但切片太厚（超过1毫米）抗体就进不去，太薄（小于0.3毫米）又容易碎。比如有个实验用0.4毫米切片，抗体结合率是85%，而0.5毫米只有78%。固定时要及时用冰冻切片机，否则组织会变硬，影响抗体结合。染色时如果酒精泡太久，细胞核就会发黄，像被太阳晒伤了一样。所以每一步都得掐着时间做，像炒菜要火候刚好。清洗时得用流水冲五分钟，不然残留的固定剂会像胶水一样粘住抗体，让结果全是白点。