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切胶回收跑电泳怎么跑-蛋白电泳切胶回收

2025-11-08 23:30:14  

切胶回收跑电泳怎么跑-蛋白电泳切胶回收

优质解答

蛋白电泳切胶回收就是剪掉电泳凝胶里没用的边角料,把中间有目标蛋白的胶块切下来再跑一遍电泳。先跑完电泳看蛋白条带位置,用刀片沿着条带边缘切下胶块,剩下的边角料扔掉。切好的胶块要重新溶解,加样缓冲液和上样缓冲液,再跑一次电泳让蛋白跑出来。这样能省胶省试剂,还能提高蛋白回收率。

为什么这样做呢?因为电泳凝胶跑完一次后,胶块中间的蛋白条带位置固定了,但边缘的胶里有杂蛋白或者没跑下来的蛋白。比如用6%的聚丙烯酰胺凝胶跑2小时,条带跑到位后,边缘胶的蛋白回收率可能只有30%-50%,而中间胶的回收率能达到70%-90%(数据来源:《蛋白质电泳技术手册》2021)。所以必须切掉边缘胶,只保留中间有目标蛋白的部分。跑胶时还要注意电压不能太高,比如120V电压下跑1小时,条带会跑太宽影响分辨率。另外切胶时要尽量靠近条带边缘,避免切掉太多胶块。溶解胶块时要用匀浆器打碎,让蛋白充分释放。跑完第二次电泳后,回收的蛋白浓度能比第一次高2-3倍,这样重复跑3次就能把大部分蛋白都回收干净了。

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切胶回收跑电泳