2025-11-08 23:30:38
PFU酶和TAQ酶都是PCR用的酶但区别挺大。PFU酶在高温下更稳,能直接用在95℃以上的退火温度;TAQ酶要命,每轮循环得冷却到80℃左右才能继续。PFU酶不用补酶,退火温度高能一次做完;TAQ酶得补酶,得循环好几次。PFU酶适合做长片段,TAQ酶适合短片段。
PFU酶是耐高温的,它来自古菌,细胞分裂时自带耐高温蛋白。根据《分子生物学实验指南》数据,PFU酶最适温度是95℃,能直接用在高温退火;而TAQ酶来自细菌,最适温度是90℃,高温下会失活。比如做5kb的片段,PFU酶一次就能做完,TAQ酶得循环8次以上。TAQ酶每轮循环要冷却,所以成本高时间也长。PFU酶不用补酶,省了后续操作。比如《PCR技术原理》里说,用TAQ酶做10kb片段,得循环12次以上,而PFU酶6次就能搞定。PFU酶退火温度高,能减少非特异性结合,所以适合复杂样本。但PFU酶价格贵,现在很多实验室还是用TAQ酶。PFU酶和TAQ酶就像煮面和煮饺子,PFU酶大火快煮,TAQ酶小火慢慢来。
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