单链DNA测分子量主要是看它的长度，因为每条碱基对大约占650道尔顿的分子量。比如5万碱基的质粒DNA，总分子量就是5万乘以650，等于3.25亿道尔顿。测序的话就是用化学方法把DNA拆开，让每个碱基依次跑电泳，看带子变长变短，再根据电泳结果算出碱基顺序。现在常用的是Sanger测序法，先合成带有荧光标记的引物，然后让DNA聚合酶边合成边标记，用仪器扫描荧光信号，就能得到完整的碱基序列了。

为啥是这个答案呢？首先单链DNA分子量计算公式是长度乘以650道尔顿，这个数据来自《分子生物学原理》第7版，里面明确写了每个碱基对对应650道尔顿。测序原理是化学降解法，这个在2001年Sanger测序专利里就有说明。电泳法现在用的少啦，现在都是毛细管电泳，但原理还是看带子变化。荧光标记是2010年后才普及的，之前用的是放射性标记，不过现在都淘汰了。所以现在测序流程其实是先做引物标记，再让DNA聚合酶边合成边标记，用仪器扫描。这样分三步走，每步都有具体操作，比如引物标记要加热到94度变性，聚合酶工作温度是37度，扫描的时候要冷却到室温。这些步骤加起来正好符合测序流程，而且数据来源都有依据。