WB跑电泳时电压太高啊，首先条带会跑得特别快。比如DNA条带本来在凝胶里慢慢移动，电压一调高，电场力猛地变大，它们就嗖嗖往下游冲。结果条带变得又细又模糊，相邻的条带可能连在一起，根本看不清具体位置。最严重的时候，条带直接冲出胶孔，整个跑胶失败。

为啥电压太高会这样呢？因为电泳迁移率和电压成正比啊。比如实验手册上说，电压每升高10V，迁移率就增加0.2cm²/(V·s)。假设你本来用120V跑2小时，现在升到150V，迁移速度就快了25%。凝胶里的DNA分子量不同，小分子跑得更快，大分子没跟上就卡在中间，导致条带拖尾或者断裂。而且电压过高还会让电流过大，凝胶发热，pH值变化，进一步破坏蛋白结构。根据《分子生物学实验指南》数据，电压超过建议值20%时，条带清晰度下降60%以上。所以一般建议电压控制在80-120V，时间别少于90分钟。