WB检测膜蛋白互作主要是拿两种抗体分别找两种膜蛋白，把膜蛋白从细胞里洗出来后，用抗体一抓一洗，抓到的蛋白再显色比色。比如抗体A专门找蛋白X，抗体B专门找蛋白Y，如果两种蛋白粘在一起，洗的时候可能一起被抓出来，显色后就能看到两者的信号同时变强。

其实WB检测膜蛋白互作主要是靠两种抗体，先让抗体A和蛋白X结合，再让抗体B和蛋白Y结合。因为膜蛋白本身带电荷，洗的时候带负电的蛋白会先被冲走，带正电的可能留下来。比如有研究显示用WB检测两种膜蛋白的相互作用准确率能达到85%以上，但抗体选择不当的话可能只有60%。比如用 mouse抗蛋白X和 rabbit抗蛋白Y组合时，信号干扰少；如果抗体来源不一致，比如 mouse和 mouse，可能结合不牢。还有洗脱条件也很关键，比如用0.1%Triton X-100洗膜时，能洗掉不结合的抗体，但洗太干净可能连有效蛋白也洗没了。比如某实验室用WB检测EGFR和PI3K的互作，调整了抗体浓度和洗膜时间后，结果从50%准确率提升到80%。所以WB检测膜蛋白互作既要选对抗体，又要控制洗膜和显色条件，否则容易出错。比如有文献说抗体浓度超过1:1000就会假阳性，洗膜次数超过3次可能漏掉有效信号。