原代细胞在实验室里养的话，最多能养到三十代左右就长不动了。冻存的话可以保存三到五年的样子，但复苏后细胞质量会打折扣。养细胞的时候得隔天换液，冻存前要降到零下196度，复苏后得观察三天看看有没有死掉。

为什么养三十代就长不动了？原代细胞刚分离出来的时候最活泼，每次传代增殖能力会逐渐下降。比如皮肤成纤维细胞传到二十代后分裂速度就慢了一半，到三十代基本就停止分裂了。根据《细胞培养技术》的数据，原代细胞传代次数和存活率的关系是：前10代存活率95%，20代降到70%，30代只有40%。冻存的话虽然能保存更久，但复苏成功率只有50%-60%，而且冻存后细胞活性会降低30%-50%。比如用液氮冻存的小鼠胚胎成纤维细胞，复苏后需要传两代才能恢复到冻存前的活性水平。