内参基因就是实验里用来当参考的那个基因，比如GAPDH或者β-actin，它们本来设计得比较稳定，但不同人身上还是会有点不一样，比如年龄大点或者生病了，表达量可能高一点或者低一点。就像量体温，虽然正常体温都是36度左右，但感冒了肯定要烧到38度，所以得拿自己的基础体温当标准。不过要是选错参考基因，比如选了个自己这组样本里刚好不表达的那个，整个实验数据就全废了。

为什么说内参基因不一定一样呢？因为每个个体的基因表达系统都跟自己身体里的其他零件一样，有独特性。就像你每天吃饭的量别人不一样，基因表达量也受环境、药物、疾病影响。2018年《Nature Methods》的研究说，用单个内参基因校正的话，不同人之间误差能达到15%，要是用三个内参基因同时校正，误差才能降到5%以内。这就好比量体重，光看一个体重秤可能不准，得多个秤交叉验证。所以现在很多实验都改用多个内参基因，就像同时拿体温计和血压计测健康一样更可靠。不过要是样本量特别大，比如千人基因组计划，发现有些内参基因在不同族群里差异高达20%，这就得专门选本族群的参考基因了。