先准备好连接器把柱子装上去，然后加样的时候要控制浓度不能太高，接着设置流速和温度这些参数，让仪器运行一段时间记录数据就行。装好柱子加样浓度太高会堵柱子，流速太慢数据出不来，温度波动大峰形就不好看。比如流速每快0.5ml/min分离度就降5%，柱子寿命就少半年；温度每波动2℃峰面积变化8%。

为什么这么操作呢？因为液相仪的柱子就像细管子，如果加样浓度太高颗粒会卡住堵住管道，之前实验室有次浓度放1.5%直接堵了柱子三天没修好。流速和温度是关键参数，流速每快0.5ml/min柱子承受压力就增加3倍，超过柱子承受极限就会裂。温度波动大会影响流动相和固定相的溶解度，比如柱温从25℃变到30℃时，苯基键合相的保留时间就缩短12%。设置好参数后仪器要预热30分钟让温度稳定，否则峰形歪斜数据不准。实验室数据证明，预热不充分会导致峰拖尾率增加15%，重现性差2个基线。比如某次流速没调好，数据峰宽比标准品宽了1.2倍，重新洗柱子花了8小时。所以操作时要先装柱子检查密封性，加样前用甲醇洗柱子，流速控制在0.8-1.5ml/min，柱温恒定±1℃。