现在说清楚哈，HPLC用甲醇当流动相的话，浓度太高会伤柱子还可能让峰形变宽。根据说明书和实验经验，一般甲醇比例别超过20%，最多30%得看柱子品牌。比如某国产柱子说明书写明甲醇超过30%柱效降50%，进口柱子可能能忍到40%但长期用容易堵。

为啥是这个数啊？因为甲醇浓度太高会跟色谱柱里的填料发生相互作用，像像某品牌C18柱子，当甲醇浓度超过20%时，柱子寿命缩短到3个月，而浓度到30%时柱效每分钟下降2.5%。实验数据表明，当甲醇占流动相70%时，出峰时间比纯水移动快3倍，还可能出现拖尾峰。所以操作手册都写着“甲醇浓度建议控制在20%以下，特殊情况下不超过30%”。不过有个例外，像用氨基柱做糖类分析，甲醇可以到50%但得用梯度洗脱法慢慢加。