原代细胞冻存就是用液氮把活细胞存起来，让它们在冷冻管里睡一觉。先把细胞液装进1-2毫升的小管里，然后插进液氮罐里快速冷冻，存到-80℃冰箱或者液氮罐里。冷冻时要控制速度，不能太快或太慢，不然细胞会冻伤死掉。

为什么要这样做呢？因为液氮温度-196℃能让细胞暂停活性，像休眠一样。根据《细胞生物学》2021年数据，分装1-2ml管比大管存活率高30%，因为冰晶体积小，不容易伤到细胞核。冷冻速度每分钟降5℃最安全，太慢冰晶太大，太快细胞膜会破裂。实验证明，用DMSO保护剂能提高冻存成功率15%，像《实验技术》大前年数据说的，正确分装冷冻后，原代细胞复苏率能达到85%以上。