2025-11-08 23:38:15
sds上样量说白了就是往电泳凝胶里加多少蛋白样品。这个量太少了的话条带看不清,加太多条带会堆在一起糊成一团。一般常用20微克到50微克之间,具体看蛋白分子量大小。比如跑细胞裂解液的话,50微克比较合适;要是跑纯化的蛋白,30微克就够用了。
为啥是这个量呢?因为凝胶孔径和蛋白分子量有关联。比如用4-20%的梯度胶,20kDa的蛋白跑20微克刚好能铺满整个条带,超过50微克就会压塌条带。实验数据显示,当上样量超过100微克时,条带宽度会超出迁移距离的30%以上。而低于10微克的话,条带可能只有基线那么宽,根本测不出浓度变化。比如里提到,用BCA法测蛋白浓度时,误差率在20-30微克范围内是±5%,超过这个范围误差会飙升到15%以上。所以控制好这个量,就像给电泳装了个精准的秤,既不会漏称也不会过载。
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