2025-11-08 23:39:31
OD值就是用分光光度计测细菌悬液的浓度高低。测的时候把细菌悬液装进比色皿,放在仪器上对着600纳米波长照一下,仪器显示的数字就是OD值。OD值越大说明细菌越多,OD值小就说明细菌少。感受态细胞要控制在OD600=1.0到2.0之间最好,太低可能转化效率低,太高可能细胞死得快。比如文献里说OD600=1.0对应约1×10^8个细菌每毫升,这样算下来刚好够做一次转化实验。
测OD值用分光光度计在600nm波长测,然后根据标准曲线算浓度,这样就能知道细菌浓度高低了。为什么非要用600nm波长呢?因为可见光区600nm附近细菌对光吸收最强,而且背景干扰少。实验数据显示,OD600=1.0时细菌浓度是1.2×10^8 CFU/mL,OD600=2.0时浓度是2.5×10^8 CFU/mL。但要注意啊,不同菌株 OD值和浓度的换算可能不一样,比如大肠杆菌和酵母菌的标准曲线就差得远。还有啊,测OD值前得把比色皿用蒸馏水洗三遍,否则残留的染料会干扰结果。上次我测OD600=0.8,结果转化效率只有30%,后来稀释到OD600=1.5才升到65%。所以OD值准不准直接关系实验成败,得仔细校准仪器,别让比色皿沾了其他物质。
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