2025-11-08 23:40:36
摇好的菌液先放-20度冻起来,复苏时用37度温水化冻就能提质粒。冻之前要装小管子,冻完别反复冻融。质粒活性会掉,但大部分还能用。
冻起来为什么能提质粒?低温让菌死掉,质粒也跟着休眠,这样运输保存更安全。实验数据说,-20度冻30天,菌体存活率70%以上,质粒提取成功率还有60%。不过复苏后要赶紧提质粒,冻太久质粒会降解。比如大肠杆菌冻30天后,质粒提取量比新鲜菌少一半。冻之前装小管子,避免结冰刺破管子。复苏时用温水别用热水,否则菌体膜破掉。要是冻了又化冻超过3次,质粒就废了。所以保存完别反复冻融,复苏一次就行。
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