摇菌提质粒就是让细菌在摇床上大量繁殖然后裂开它们提取质粒一般需要12-24小时培养离心后裂解菌体用酒精沉淀质粒这个过程中细菌数量和质粒纯度会互相影响比如培养时间太短细菌没长多质粒就太少太长细菌裂解不彻底还可能把质粒吃掉所以得找中间值

为什么摇菌提质粒是这个步骤呢首先细菌在液体培养基里摇床震荡能均匀接触氧气促进分裂实验数据显示24小时培养后细菌数量比12小时多3倍但质粒产量只高30%这说明培养时间要足够长但又不能超过质粒半衰期比如大肠杆菌质粒在4小时后开始降解所以一般选18-24小时这个时间段细菌裂解率能达到85%同时质粒保留率超过70%离心时上清液里的杂质比沉淀多5倍多所以必须用酒精沉淀质粒浓度比裂解液高200倍才能看得清

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