保菌就是让农杆菌活着不坏掉，像存钱一样定期维护。每代培养后要冻存，冻存后每半年检查有没有杂菌，杂菌多了就要重新复苏。冻存用甘油管，-80度冰冻，复苏时先化冻再转接。冻存时间别太长，一般别超过三年，否则菌活力下降。

为什么这么操作呢？农杆菌是跟植物细胞打交道的，杂菌一多就抢营养，还可能抢走目标基因。实验数据说，每传三代杂菌风险增加30%，冻存三年后复苏成功率从95%降到70%。甘油能渗透细胞防结冰，但浓度太低冻不住，太高中了又伤细胞。-80度冰冻比液氮便宜，但得保证冻存管密封严实，否则甘油挥发就废了。复苏时先放4度缓释冰晶，再逐步升温，这样菌体损伤少。比如某实验室统计，按这个方法保存的农杆菌，连续传代超过50代的成功率比乱操作的提高2倍多。