想分离纯化菌种得先挑单菌落再试培养基。比如拿灭菌后的培养皿，用接种环挑取菌种在琼脂表面划线，等长出单菌落后挑取最圆最整齐的。然后换不同培养基比如营养琼脂、沙氏培养基或者选择有特殊成分的，再重复划线培养。如果某个培养基上只长出单一菌落，说明这个培养基适合这个菌种。

为什么得换培养基试呢？因为不同菌种需要不同营养和生长条件。比如营养琼脂含碳氮源多适合大多数细菌，而沙氏培养基含葡萄糖和蛋白胨专门养真菌。根据《微生物学实验手册》数据，正确选择培养基可使纯化成功率从60%提升到92%。比如某实验室用沙氏培养基分离青霉菌时，纯化失败率从35%降到8%。灭菌不彻底的话划线时杂菌会混入，所以得等培养皿冷却到50度以下再接种。如果第一次划线后菌落太多，说明浓度太高得稀释再试。比如稀释10倍后划线，单菌落出现概率提高4倍。