要判断转染是否成功，首先得看有没有外源基因起作用。比如用荧光蛋白标记的质粒转染后，过一晚用荧光显微镜看细胞有没有发光。如果看到绿色或红色光点，说明成功；如果没光，可能转染失败。另外一种方法是取细胞提取蛋白质，用Western Blot检测有没有目标蛋白。还有的用qPCR测mRNA是否增加，比如转了致癌基因的细胞，mRNA量应该比没转的翻倍。

为什么得用这些方法？因为荧光蛋白像小灯泡，显微镜一照就能直接看到，误差小。有研究说用GFP标记时，转染效率可达60-80%（数据来源：《分子细胞生物学实验手册》）。Western Blot虽然麻烦，但能准确定量蛋白，比如转了EGFP的细胞，蛋白条带灰度值比对照组高3倍以上（数据来源：2021年《细胞生物学通讯》）。qPCR更灵敏，能测到0.1%的转染效率，比如转了pCMV-β-gal的细胞，mRNA量是未转的5倍（数据来源：2019年《基因工程学报》）。不过得注意，转染效率受细胞类型影响，比如HEK293细胞可达70%，而普通贴壁细胞可能只有30%。所以得结合显微镜、蛋白和核酸检测，三者都达标才算成功。