先让细菌在液体里长到足够多，倒进离心管摇晃均匀；接着用离心机把细菌压到管底，倒掉液体只留细菌沉淀；然后加裂解液把细菌壁打碎，让质粒跑出来；用清水洗掉杂质，加少量液体让细菌保持活性。

为什么这么操作呢？因为细菌在液体里大量繁殖才能提高转化效率，实验数据显示对数生长期细菌转化率比休止期高3倍。离心时要让细菌沉淀更紧密，这样倒液体时不会带出细胞碎片，离心机转速一般选8000转每分钟，时间3分钟最合适。裂解液用碱性溶液能破坏细菌细胞壁，同时保持质粒完整，pH值调到12.5时裂解效果最好。实验证明裂解后洗涤3次，残留裂解液会降低质粒纯度，所以必须用清水多洗两遍。加的液体不能太多，否则细菌会分散影响转化率，通常用1毫升就能让1克细菌保持活性。