2025-11-08 23:42:52
内参基因就是用来校准的,Ct值就是看它消失的时间,数值低说明样本多,高说明少。这样就能对比不同样本的准确量。比如测DNA的时候,内参基因和目标基因同时跑,跑完看哪个先到Ct=20,说明那个基因的量更多。数值相差越大,说明差异越明显。
对吧?因为内参基因选得对,才能让结果误差小。比如Ct=20代表1e-20拷贝,Ct=25是1e-25,相差5个数量级。内参基因选得对,就能让结果误差小于5%,比如研究显示稳定基因如GAPDH的变异率只有0.3%,远低于样本处理带来的波动。所以实验前必须验证内参基因的Ct值是否在20-25之间,太低说明样本浓度太高,得稀释,太高说明得加模板或者换基因。比如有人测到Ct=30,那结果可能差10倍以上,得重做。
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