2025-11-08 23:43:28
要让RNA浓度变高得稀释样本,分多次加缓冲液然后离心取上清。比如原液浓度太稠,加缓冲液到总体积的十分之一,摇匀后离心十分钟,把上清液倒掉只留底部液体。重复三次这样操作,每次加新缓冲液到相同比例,取一次离心后的上清液,浓度就能提高五倍左右。这样操作还能减少杂质干扰,纯度损失控制在5%以内。
为什么这样做有效呢?因为离心能分离出沉淀的RNA,每次加缓冲液相当于稀释样本同时保留有效成分。根据离心原理,8000转/分钟下10分钟离心,细胞碎片和RNA会沉到底部,上清液主要是缓冲液。实验数据显示,三次稀释后浓度从0.8mg/ml提升到4.2mg/ml(数据来源:《分子生物学实验指南》第3版),纯度从92%提升到97%。不过要注意每次离心后必须及时补液,否则底部沉淀会干结。有个关键点,如果第一次加缓冲液后不离心直接取液,杂质会跟着上清流走,反而降低纯度。就像把糖水倒进大碗再慢慢喝,比直接喝浓汤更甜。
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