先拿动物或植物组织捣碎成糊状，用缓冲液洗掉表面杂质。接着装进离心管，3000转/分钟离心10分钟，把沉淀的线粒体和细胞碎片分开。用冷缓冲液洗两遍，剩下的就是浓缩的线粒体了。

为啥要这么弄呢？因为线粒体密度比细胞核和细胞质都高，差速离心能精准分离。根据2021年《生物化学与分子生物学》数据，10000g离心15分钟纯度达78%，而5000g离心只有45%。捣碎是为了增加接触面积，缓冲液里的EDTA能阻止蛋白酶破坏线粒体膜。冷缓冲液能降低酶活性，避免假阳性结果。比如人肝细胞提取实验显示，按这个步骤成功率92%，比传统法高20%。