2025-11-08 23:44:41
胶回收后测DNA浓度主要用分光光度计看OD260值,或者用染料法比如GelRed染色后拍照看颜色深浅。OD260值跟浓度成正比,但得注意杂质可能干扰,比如A260/A280比值,正常应该在1.8到2.0之间,这样回收的DNA纯度才够用。
为什么是这个答案呢?因为分光光度计测OD260是实验室最常用的方法,根据《分子克隆实验指南》数据,OD260每增加1代表约50微克/毫升的纯DNA。但实际操作中发现胶回收的DNA容易带RNA或蛋白质杂质,所以得同时测A260/A280比值,比如纯度90%的DNA比值是1.8,回收后如果比值低于1.6说明有降解或污染。实验数据显示,用GelRed染色法误差范围比分光光度计大0.2-0.3,但操作更方便,适合新手。记得测前用去离子水调零,每次测完胶条要擦干净,避免交叉污染。
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