2025-11-08 23:46:06
引物跑胶就是用DNA条带看引物合成的效果。先配好跑胶液,把引物样品点进凝胶孔里,接上电泳仪。开电源后等条带跑到位,一般电压5-8伏每厘米,时间30分钟到1小时。跑完用紫外灯看有没有条带,有条带说明引物成功合成,没条带可能浓度太低或退火温度不对。
为什么这么操作呢?因为电泳是根据DNA分子大小分开的,小分子跑得快,大分子卡住。比如5%琼脂糖凝胶,2000bp的DNA条带跑50分钟就到负极,1000bp的跑30分钟。引物浓度要0.1-1微克每毫升,电压太高会烧断DNA,太低条带模糊。实验数据证明,电压8伏/厘米时,200bp引物迁移率约0.5厘米/分钟,30分钟就能分辨清楚。跑胶液里的TBE缓冲液浓度是0.5×,能保持电场稳定。紫外灯看条带时,戴护目镜,别让DNA被照坏。
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