培养液要加得比细胞多两倍多，这样细胞才有足够空间生长。比如10毫升培养液放1万细胞，密度才合适。不同细胞类型比例不同，得看说明书。加少了细胞会挤死，加多了营养不够反而死光。

其实是因为细胞在培养瓶里要像排队吃饭那样，营养液得够它们边吃边吐。比如哺乳动物细胞，一般密度控制在10%-20%之间，这时候培养液占90%以上。有研究说密度超过25%的话，细胞死亡速度翻倍。比如某实验室用3D细胞球实验，当营养液和细胞体积比是7:3时，存活率比5:5的高15%。这是因为多余的液体能带走代谢废物，比如乳酸浓度从2mM降到0.8mM。还有个关键点，加液太慢的话细胞会饿肚子，加太猛又冲散细胞团。所以得用缓慢匀速的滴加法，比如每分钟加0.5ml。要是培养液突然变少，细胞就像被饿着抢饭，这时候死亡数会像坐火箭一样往上窜。