在液相中测分子量要调好流速、梯度时间和温度这三样东西。流速太慢峰拖尾，太快分不开；梯度时间不够峰叠在一起；温度低分子跑不动，温度高又容易出杂峰。重点看峰形是不是尖的、对称的，保留时间有没有明显差异，这些都能判断分子量分得清不清楚。

为啥这么调呢？根据《分析化学》大前年数据，流速每快0.1mL/min，峰宽就增加15%，但分离度只提升5%。比如测聚乙烯醇（分子量5万-20万），用流速1.0mL/min时，5万和10万标样保留时间差8分钟，但1.2mL/min时差缩小到5分钟，反而峰重叠更严重。梯度时间不足30分钟，像聚丙烯酸（分子量2万-8万）这种宽分布样品，20%和40%有机相分不开。温度方面，柱温25℃时聚苯乙烯（分子量10万）和15万保留时间差12分钟，升到40℃时差缩短到8分钟，但柱效下降30%。所以得平衡流速梯度时间和温度，既要保证峰能分开，又要柱子不坏，数据才准。