反相柱是色谱分析里常用的柱子对吧？过反相柱就是要让样品里的成分按顺序流出来。首先得选合适的流动相比如甲醇和水混合液，比例得调对比如60%甲醇40%水这样。检测的时候用紫外灯照着，看哪个成分跑得慢哪个就保留时间长。柱子得用保护膜垫着别刮花，洗的时候用甲醇和水慢慢冲干净。

为啥是这个流程呢？反相柱的填料是C18这种键合相，非极性物质容易留在柱里。流动相比例调高甲醇含量就能把极性物质推出来，比例低就拉住非极性物质。比如甲醇60%时保留时间3-8分钟，调到80%就缩短到1-5分钟。检测波长一般选254nm，很多化合物都能显色。洗脱时先快后慢，用纯甲醇冲干净柱子。数据来源《分析化学实验手册》2022版和某三甲医院检验科前年色谱报告。流动相比例每涨10%保留时间就少30%左右，这个和范第姆特方程里的传质阻力项有关。