抗体选不对，实验全白干。先看清楚实验目的，是测蛋白表达还是定位细胞器？接着得查抗体公司官网，看看他们标的是不是一抗还是二抗，纯度多少。比如做免疫组化选纯度95%以上的抗体， western blot 选80%以上的就行。做完实验后还得跑复孔，要是三组数据都一致才放心。

为啥得这么选？纯度低容易出假阳性，有份数据显示纯度低于80%的抗体做 western blot，假阳性率能涨到30%以上。比如某实验室用纯度75%的抗体测磷酸化蛋白，结果三组数据波动大，发现是抗体里的杂质干扰了。另外选二抗要注意宿主匹配，比如兔抗用HRP标记的HRP二抗，别混着用驴抗的二抗。文献里别人用过这个抗体吗？有篇大前年《Cell Research》的文章说，用别人验证过的抗体，实验重复性好，失败率能从40%降到10%。跑复孔不是走形式，有实验室复孔发现抗体批次不同，结果差了2个数量级。所以选抗体得按部就班，少走弯路。