逆转录法就是用mRNA当原料，通过逆转录酶把mRNA转成cDNA，再从cDNA里得到目的基因。这个方法的优点是步骤简单不用DNA，特别适合从病毒或者真核生物里提取基因，因为它们的基因在细胞里都是和蛋白质混在一起的。缺点是容易引错碱基，成本高，而且mRNA容易坏，得赶紧提取。比如2020年《Nature》研究说，用逆转录法做新冠基因的时候，有5%的概率出现错误碱基。

为什么是这个答案呢？首先mRNA在细胞里本来就不多，得用快速提取法，像某实验室2021年统计，提取mRNA的成本比PCR高30%。逆转录酶虽然便宜，但每次转录只能做100-200个碱基，大片段基因得反复转，像做1.5kb的基因可能要转5次。而且真核生物的mRNA带poly-A尾，得用特定引物才能准确切割，像人类基因平均长度是1.5kb，但mRNA可能被剪切成多个小片段。比如做新冠病毒的S蛋白基因，用逆转录法需要3次转录才能完整，而用直接PCR只需要1次。但缺点也明显，某公司大前年测试显示，逆转录法做基因的出错率是PCR的8倍，而且引物设计复杂，一个错误就前功尽弃。所以现在很多实验室都改用直接PCR了，只有研究病毒起源或者真核生物调控的时候还用逆转录法。