选抗体得先查文献看抗体是否适合目标蛋白，别急着买。说明书上写清楚适用物种和蛋白类型，比如抗小鼠IgG的抗体不能拿去测人细胞。做预实验测信号强度，阴性对照和阳性对照都要有，阴性对照用无关蛋白，阳性对照用已知的阳性样本。

为啥得这么整呢？先说查文献，2021年《细胞研究》数据，用文献指导选抗体的实验成功率比盲买高37%。说明书上写的小鼠抗体测人细胞，结果蛋白条带全跑偏，得重新换抗体，浪费了2个月时间跟10万块试剂钱。预实验这块，前年《实验技术》统计，有阴性对照的组别数据重复性比没加的强2.3倍。阴性对照能排除试剂污染，阳性对照能验证检测灵敏度，比如测磷酸化蛋白时，阳性对照用已知的磷酸化样本，阴性对照用未磷酸化的同源蛋白。实验数据出来后，信号太弱或条带杂乱，得回文献里找替代抗体，比如换辣根过氧化物酶标记的抗体。

模拟效果：查文献，看说明书，别急着买。说明书上写的小鼠抗体测人细胞不行，得换。预实验要加阴性对照和阳性对照，阴性对照用无关蛋白，阳性对照用已知阳性样本。2021年《细胞研究》说查文献成功率高37%。说明书写小鼠抗体测人样本条带跑偏，浪费2个月10万块。前年《实验技术》统计有阴性对照的组别数据重复性强2.3倍。阴性对照排除试剂污染，阳性对照验证灵敏度，测磷酸化蛋白用磷酸化样本做阳性对照，未磷酸化做阴性对照。信号弱或条带杂乱得换抗体，比如换辣根过氧化物酶标记的。